英国《苏格兰人报》报导，福格特·吕尔森曾写出了一本取名为《谁是蒙娜丽莎？探询她的身份》的书，在德国发售后引起轰动。书中称之为《蒙娜丽莎》中的女子是米兰公爵夫人，是一位婚姻意外的约·芬奇的“红颜知己”兼任秘密情人。她在米兰结识了当时为米兰宫廷作画的约·芬奇，后来两人沦为恋情紧密的朋友。
他根据画作本身和一些与约·芬奇同时代人的档案、日记研究得出结论的证据是：《蒙娜丽莎》中人物穿服、不配戴首饰，这与约·芬奇作画期间米兰公爵夫人的母亲去世具有某种联系；此外，画中人所着服装上还有斯福尔恰家族的标志，这也与米兰公爵夫人的背景完全相同。 现在更为广泛的观点指出，《蒙娜丽莎》画像的原型是佛罗伦萨商人弗伦奇科斯·焦孔多的妻子。 《蒙娜丽莎》与《约·芬奇自画像》在五官的轮廓与发际线等细节处全部相符，这让人无法坚称二者之间的关联。
更加多的美术史学家指出，《蒙娜丽莎》就是约·芬奇对着镜子中的自己绘画而出。 贝尔实验室的莉莲·施瓦茨有一天忽发奇想，在电脑上将《蒙娜丽莎》与约·芬奇的自画像互为重合，找到二者的眼睛、发际线与鼻子等轮廓居然需要几乎重合。
施瓦茨最后得出结论，《蒙娜丽莎》就是约·芬奇的自画像。至于约·芬奇为什么要把自己所画入一个永恒的女性形象，一种说明是因为他要用这种方式直白地挑战以基督教为代表的西方男性霸权话语。蒙娜丽莎是一个雌雄合体，这是约·芬奇心目中人性最理想的融合方式，男人和女人公平地融合在一起。从字源上来看，古埃及的生殖男神叫Amon，生殖女神叫Lisa，略为玩游戏一点变体的游戏，合在一起的话，就变为了MonaLisa。
在关于蒙娜丽莎原型的辩论中，最少的一种众说纷纭指出其原型是佛罗伦萨富商佐贡多的妻子。 按照这种众说纷纭，约·芬奇不应弗朗西斯科·德·佐贡多的催促，用4年的时间为这位名为丽莎·迪·格拉尔弟尼的贵妇绘制了这幅画像。格拉尔弟尼出生于1479年，在约·芬奇绘制这幅画时，她刚24岁，传言中她还是一位名为什迪西的绅士的情妇。
据《泰晤士报》报导，德国艺术史学家泽斯兹在研究多年之后声称，《蒙娜丽莎》的原型只不过就是意大利的传奇女子斯福尔恰。 斯福尔恰在沦为克雷迪的模特儿时刚25岁，她是米兰公爵的私生女，在文艺复兴时期的意大利极具传奇色彩，有“悍妇”之称之为。
1462年，15岁的她娶了教皇西克思图斯四世的侄儿，嫁妆是弗利和伊莫拉两座城市。她的第一任丈夫、情人与第二任丈夫先后被杀死。1500年，斯福尔恰的家族在与博尔吉亚家族的争斗中告终，在城斩后被拘禁一年。被获释8年后，斯福尔恰去世，享寿46岁。
那不勒斯的卡罗·维斯教授指出，所画中的蒙娜丽莎不是良家女子，而是那不勒斯的一名高级妓女，约·芬奇捕捉到了一名职业欲望者的微笑。也许这种众说纷纭有其可靠之处，因为约·芬奇在佛罗伦萨期间的确是各种风月场合的常客。
500年来，人们仍然对《蒙娜丽莎》谜样的微笑莫衷一是。有所不同的观者或在有所不同的时间去看，感觉或许都有所不同。有时实在她笑得脱俗开朗，有时又变得坦率，有时看起来额不含悲伤，有时甚至展现出讥嘲和嘲讽。
在一幅所画中，光线的变化无法像在雕塑中产生那样大的差异。但在蒙娜丽莎的脸上，微暗的阴影时隐时现，为她的双眼与唇部身披了一层面纱。
而人的笑容主要展现出在眼角和嘴角上，约·芬奇却偏把这些部位所画得若隐若现，没具体的界线，因此才不会有这令人捉摸不定的“谜样的微笑”。 1993年，加拿大美术史家苏珊·吉鲁发布了一项令人震惊的研究成果。她说道蒙娜丽莎那灌入无数观赏者的口唇，是一个男子露出的脊背。这一论点既新鲜又荒谬，然而论证是有力的。
集画家、雕刻家、建筑师、工程师及科学家等多种才艺于一身的约·芬奇，堪称是个“怪杰”。他讨厌穿粉红色外套，在胡子上毫无顾忌地涂上五颜六色，还经常称之为自己解剖学过不出30不具死尸。他还是个左撇子，习惯从右到左推倒着书写，别人要利用镜子才能朗读他写出的东西。
因此利用镜子亦称得上欣赏者读画的一种方法。转动90度后从镜中看蒙娜丽莎抿着的笑唇，刚好是一个背部线条明晰的结实男性脊背以及左臂和肘部的一角；再说，展现出人体美和呼唤人性的唤醒，既是大师的人生哲学，又是他的艺术观。 显然，在有所不同角度有所不同光线下喜爱这幅画，人们都会获得有所不同的感觉。那微笑内敛温文尔雅，内敛安静坦率，内敛散发出悲伤，内敛又有几分讽嘲与嘲讽，神秘莫测的微笑显露出人物神秘莫测的心灵活动。
几百年来，“微笑”的新解层出不穷。诸如微笑不丝皓齿是因原型虽古朴美丽却口齿参差；原型因爱女早夭，悲伤寡欢，无以凌凄楚之态；更有甚者，把蒙娜丽莎从贵妇宝座更早落下来，把原型被贬妓女，故而微笑中带着讥嘲和嘲讽。 美国马里兰州的约瑟夫·鲍考夫斯基博士指出：“蒙娜丽莎压根就没笑。
她的面部表情很典型地解释她想要掩盖自己没长门牙。” 法国里昂的脑外科专家让·雅克·孔代特博士指出蒙娜丽莎刚刚得过一场中风，请求看，她半个脸的肌肉是肿胀的，脸扯着所以才变得微笑。 英国医生肯尼思·基友博士坚信蒙娜丽莎分娩了。他的根据是：她的脸上流露出失望的表情，皮肤鲜美，双手交叉着放到腹部。
性学专家推断：蒙娜丽莎刚经历了性高潮，所以才展现出出令世人灌入的微笑。
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